hiPSC-GFP:JY04-01-01
hiPSC-mCherry:JY04-02-01
hiPSC-BFP:JY04-03-01
细胞规格:1×106 cells/支
细胞来源:
hiPSC-GFP:25岁健康男性(GEMi005-A)
hiPSC-mCherry:34岁健康男性(GEMi022-A)
hiPSC-BFP:34岁健康男性(GEMi022-A)
细胞简介:
我司自主研发的人诱导多能干细胞(hiPSC-GFP/mCherry/BFP)报告工具细胞系,是通过非整合性重编程技术从外周血单个核细胞(PBMC)高效诱导获得,通过过表达方式导入绿色/蓝色/红色荧光蛋白(GFP/mCherry/BFP)。该细胞系具有以下突出优势:
1)保持稳定的快速增殖能力,长期培养中维持正常核型;
2)呈现与hESC高度相似的典型克隆形态及多能性基因表达特征;
3)在体外定向分化中证实其具有完整的三胚层分化潜能;
4)GFP/mCherry/BFP标记表达稳定,为细胞示踪研究提供可视化工具。本细胞系经过严格质量控制,是开展干细胞基础研究、药物筛选及再生医学应用的理想标准化工具。
冻存细胞:
细胞接收后,观察包装是否完整,检查箱内干冰是否充足,观察细胞在运输中有无融化迹象,冻存管是否完整。若有问题,请拍照留存,立即反馈。无异常需立即转移至液氮罐中,可暂时放至-80℃冰箱中,切记不可在-80℃长时间储存,在液氮中可长期存储。
使用范围:本产品仅供科研使用,不可用于临床治疗等其他用途。
二、构建方法
本产品通过构建质粒载体并利用慢病毒包装系统实现高效转导,使绿色/红色/蓝色荧光蛋白基因在靶细胞基因组中稳定整合并持续表达,从而获得长期可追踪的荧光标记效果。
1、质粒图谱:
绿色荧光标记:pLVX-EGFP-Puro
红色荧光标记:pGWLV24-mCherry-Puro
蓝色荧光标记:pGWLV75-BFP-G418
2、细胞形态
荧光显微镜下hiPSC-GFP细胞形态(A.冻存前单克隆照片;B.产品复苏后照片)
荧光显微镜下hiPSC-mCherry细胞形态(A.单克隆形态;B.传代过程中细胞形态)
流式检测BFP荧光率